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    蛋白互作分析

    蛋白互作分析

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      蛋白互作?#33455;?#25216;术:「FRET」VS「Duolink PLA」
     
      荧光能?#25239;?#25391;转移 (FRET)
      检测活体中生物大分子纳米?#27602;?#31163;和纳米?#27602;?#31163;变化的有力工具,广泛应用于生物大分子相互作用分析、细胞生理?#33455;俊?#20813;疫分析?#21462;?/div>
     
      原理
      当供体荧光分子的发射光?#23376;?#21463;体荧光分子的吸收光谱重叠,并且两个分子的距离在 10nm 范围以内?#20445;?#23601;会发生一?#22336;?#25918;射性的能量转移,即 FRET 现象,使得供体的荧光强度?#20154;?#21333;独存在时要低的多(荧光猝灭),而受体发射的荧光却大大增强(敏化荧光)。
     
     
     
      应用
      1、生物大分子结?#36141;?#21151;能?#33455;浚合?#32990;膜受体之间相互作用、细胞内分子之间相互作用、膜蛋白的定位修饰、检测酶活性变化等
      核酸杂交分析
      3、免疫分析:不仅?#35270;?#20110;小分子 (如半抗原),而且?#35270;?#20110;大分子 (如蛋白质)。
     
      特点
      1、实验背影低,但抗原、抗体纯度要求较高;
      2、简便的均相检测(不需要洗板),操作简单;
      3、实验产物比较稳定,可用于固相分析或利用特殊的荧光显微镜进行单细胞分析,但需要特殊的辅助设备;
      4、应用灵活多样检测组合丰富,需要融合蛋白的表达5、可用于复杂环境下的分析,?#33455;?#27963;细胞生理条件下?#33455;?#34507;白质-蛋白质间相互作用。
      6、有效的作为 1.0~10.0nm 距离范围。
     
     
     
     

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